产品货号：
SY0359
中文名称：
SDS-PAGE胶制备试剂盒
英文名称：
SDS-PAGE Gel Preparation Kit
产品规格：
30～50gels|150～250gels
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶，大大简化了制胶过程。
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
保存：2～8℃，避光，有效期1年。
附表1：不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
附表2：不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系
附表3：5% SDS-PAGE浓缩胶配制体系
相关搜索：SDS-PAGE胶制备试剂盒，SDS-PAGE凝胶配制试剂盒，SDS-PAGE Gel Preparation Kit
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
| 组分 | 30～50gels | 150～250gels |
| 30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺(29:1) | 100mL | 500mL |
| 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液(pH8.8) | 70mL | 350mL |
| 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液(pH6.8) | 30mL | 90mL |
| APS过硫酸铵 | 0.5g | 2.5g |
| TEMED四甲基二乙胺 | 0.6mL | 2.8mL |
保存：2～8℃，避光，有效期1年。
- 丙烯酰胺溶液和TEMED有毒，请适当防护。
- APS溶液不稳定，当配制成10%溶液后，分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间，以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长，需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
- TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。
- 凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下，可通过适当调节TEMED以及APS的用量，控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
- 温度较低时，4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。
- 凝胶配制过程，特别是液体混匀步骤，需尽量避免气泡的产生。
- 在分离胶上层进行水压时需小心操作，加水速度不宜过快。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本制品仅作科研用途！
- 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，参考附表1。
- 按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶，制胶程序如下：
- 将不同体积的30% Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
- 加入10% APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免气泡产生；
- 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液，对于mini胶，分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层，从而压平凝胶表面；
- 静置30～60min，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面，表面凝胶已聚合；
- 将不同体积的30% Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
- 按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶，制胶程序如下：
- 去除覆盖在分离胶上的水层。
- 将不同体积的30% Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
- 加入10% APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
- 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
- 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
- 静置10～20min，等待浓缩胶聚合。
- 待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
- 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液(可选)，然后进行上样和后续的常规电泳操作。
- 去除覆盖在分离胶上的水层。
附表1：不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%凝胶 | 50～150 KD |
| 8%凝胶 | 30～90 KD |
| 10%凝胶 | 20～80 KD |
| 12%凝胶 | 12～60 KD |
| 15%凝胶 | 10～40 KD |
附表2：不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 (mL) | 所需各组分体积（单位：mL） | ||||
| 蒸馏水 | 30% Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液(pH8.8) | 10% APS | TEMED | ||
| 6% | 5 | 2.7 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10 | 5.4 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15 | 8.1 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20 | 10.8 | 4.0 | 5.0 | 0.2 | 0.016 | |
| 30 | 16.2 | 6.0 | 7.5 | 0.3 | 0.024 | |
| 50 | 27.0 | 10.0 | 12.5 | 0.5 | 0.040 | |
| 8% | 5 | 2.37 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10 | 4.7 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15 | 7.1 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20 | 9.5 | 5.3 | 5.0 | 0.2 | 0.012 | |
| 30 | 14.2 | 8.0 | 7.5 | 0.3 | 0.018 | |
| 50 | 23.7 | 13.3 | 12.5 | 0.5 | 0.030 | |
| 10% | 5 | 2.03 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 4.07 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 6.1 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 8.1 | 6.7 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 12.2 | 10.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
| 50 | 20.3 | 16.7 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
| 12% | 5 | 1.7 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 3.4 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 5.1 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 6.8 | 8.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 10.2 | 12.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
| 50 | 17.0 | 20.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
| 15% | 5 | 1.2 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10 | 2.4 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15 | 3.6 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20 | 4.8 | 10.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
| 30 | 7.2 | 15.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
| 50 | 12.0 | 25.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
附表3：5% SDS-PAGE浓缩胶配制体系
| 凝胶体积 （mL） | 所需各组分体积（mL） | ||||
| 蒸馏水 | 30% Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液(pH6.8) | 10% APS | TEMED | |
| 2 | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4 | 2.28 | 0.68 | 1.0 | 0.04 | 0.004 |
| 6 | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8 | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.008 |
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